CMC重點是產(chǎn)品安全和生產(chǎn)控制，產(chǎn)品生命全過程各關(guān)鍵節(jié)點的檢測項和驗收標(biāo)準(zhǔn)，以及如何應(yīng)對開發(fā)階段的生產(chǎn)變更做出了詳細(xì)說明。2017年12月NMPA頒布的《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》、2018年6月NIFDC頒發(fā)的《CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》確定如何對CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品在不同研發(fā)階段進行質(zhì)量控制，保障產(chǎn)品全生命周期安全、有效和質(zhì)量可靠。

—— 載體生產(chǎn)和檢測

2020年1月 “Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs)”，即GT CMC指南，為載體的生產(chǎn)和檢測提供了建議。申請IND，必須根據(jù)cGMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)載體，并且分析方法需驗證；申請BLA審查期間，載體生產(chǎn)設(shè)施將接受檢查。FDA建議描述載體結(jié)構(gòu)、主細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫的表征和測試、參考物質(zhì)的表征、載體生產(chǎn)和檢測以及載體穩(wěn)定性。載體批次放行檢測應(yīng)包括安全性、鑒定、純度和效價的測量。此外，F(xiàn)DA建議載體批次放行測試包括檢測載體濃度，優(yōu)化T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)以確定每個細(xì)胞需要加入的載體量，以達到CAR-T細(xì)胞制劑中CAR陽性細(xì)胞的目標(biāo)百分比。

GT CMC指南，圖源?| FDA官網(wǎng)

——?細(xì)胞起始材料的收集、處理和測試

由于供體差異，可能是批次間變異性的主要來源。FDA建議從收集到生產(chǎn)前階段，處理起始材料所用的工藝如2020年1月指南“GT CMC指南V.A.2.c.ii”部分所述，在所有白細(xì)胞分離收集地點都實施這些程序，應(yīng)包括運輸過程和冷凍保存步驟的驗證，包括在預(yù)期條件下對白細(xì)胞分離起始材料穩(wěn)定性的評估。建立白細(xì)胞分離起始材料的驗收標(biāo)準(zhǔn)，可以指定最少細(xì)胞數(shù)、活力和CD3+細(xì)胞百分比等。

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——?CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)和檢測

2020年1月指南“GT CMC指南”中說明了生產(chǎn)體外修飾細(xì)胞的建議：早期產(chǎn)品表征（IV.A）、雜質(zhì)特性（V.A.3.b.i和ii）、生產(chǎn)工藝開發(fā)（V.A.2.f和V.B.2.c）和設(shè)施考慮（V.C.1）。本指南為CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)和檢測提供了具體建議和額外細(xì)節(jié)。

—— CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品生命周期內(nèi)生產(chǎn)變更管理和可比性評估

CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品生命周期中的變化，包括最終容器、培養(yǎng)過程中使用的細(xì)胞因子或細(xì)胞擴增持續(xù)時間的變化，都可能會影響產(chǎn)品質(zhì)量、安全性、功效或穩(wěn)定性，F(xiàn)DA建議申請人在考慮此類變更時與OTAT溝通。

在規(guī)劃此類變更時，一般建議申請人考慮以下事項：

1）載體生產(chǎn)過程的重大變化（例如，從貼壁培養(yǎng)到懸浮培養(yǎng)）應(yīng)得到可比性研究的支持，評估此類變更對載體和CAR-T細(xì)胞的影響，應(yīng)包括對變化前后載體的并行分析。

2）對于培養(yǎng)基中生長因子或添加物濃度或類型的變化，應(yīng)進行更穩(wěn)健的可比性研究。

3）當(dāng)CAR-T細(xì)胞或載體生產(chǎn)設(shè)施發(fā)生變化時，應(yīng)建立生產(chǎn)設(shè)施之間的可比性。

變更管理

關(guān)鍵實施及產(chǎn)品開發(fā)階段變更，應(yīng)進行風(fēng)險評估，該風(fēng)險評估應(yīng)告知是否需要進行分析性可比性研究。FDA建議在啟動可比性研究或?qū)嵤┳兏?，將擬議變更的細(xì)節(jié)、伴隨的風(fēng)險評估和擬議變更管理策略作為修訂提交到IND，建議申請人與OTAT討論研究設(shè)計和驗收標(biāo)準(zhǔn)。可根據(jù)ICH Q5E中描述的一般原則，評估CAR-T細(xì)胞變化前后的分析可比性。

如果沒有足夠的證據(jù)證明分析的可比性，則可能需要進行新的非臨床或臨床研究，這可能會推遲產(chǎn)品批準(zhǔn)。如果開發(fā)后期變更，且沒有支持BLA的額外臨床研究計劃，則分析可比性研究應(yīng)與批準(zhǔn)產(chǎn)品進行的研究一樣全面和徹底。

可比性研究設(shè)計

FDA建議，擬議的分析方法適用于檢測變更對產(chǎn)品安全性和有效性的潛在影響。用擬議變更生產(chǎn)的產(chǎn)品能滿足當(dāng)前放行標(biāo)準(zhǔn)的證明通常不足以建立可比性。應(yīng)使用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計方法和預(yù)定義的驗收標(biāo)準(zhǔn)進行分析。進行批次放行測試的屬性外，還應(yīng)使用可靠的分析方法監(jiān)測各種產(chǎn)品屬性，包括細(xì)胞表面標(biāo)記。

由于自體CAR-T細(xì)胞的細(xì)胞起始材料固有的變異性，使用歷史批次來評估可比性可能不夠。FDA建議盡可能使用相同的細(xì)胞起始材料，通過并行測試來評估CAR-T細(xì)胞的可比性。如使用來自健康供體的CAR T細(xì)胞進行可比性研究，當(dāng)健康供體生產(chǎn)的產(chǎn)品不足以評估自體CAR-T細(xì)胞的產(chǎn)品可比性，可比性研究還應(yīng)包括對由患者細(xì)胞起始材料生產(chǎn)的CAR T細(xì)胞的評估。

—— 單中心或多中心生產(chǎn)

單點生產(chǎn)

收集細(xì)胞起始材料，并將其運送集中生產(chǎn)點生產(chǎn)CAR T細(xì)胞。CAR-T細(xì)胞隨后被運送到本地或遠(yuǎn)程臨床地點進行給藥。單點生產(chǎn)可能降低因設(shè)施之間差異而產(chǎn)生的產(chǎn)品可變性。

多中心生產(chǎn)

多中心生產(chǎn)可以縮短從細(xì)胞起始材料收集到自體產(chǎn)品給藥時間；然而，制造設(shè)施之間差異可能會導(dǎo)致產(chǎn)品可變性，申請人應(yīng)該證明在每個中心生產(chǎn)的產(chǎn)品有可比性，以支持臨床試驗結(jié)果分析。FDA建議在可能的情況下，在整個生產(chǎn)設(shè)施中使用相同的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）、培訓(xùn)、試劑和設(shè)備，還建議IND描述各生產(chǎn)場所制造過程中的任何差異。FDA建議提交數(shù)據(jù)，最好是來自使用相同細(xì)胞起始材料在每個中心進行鑒定，以證明每個中心生產(chǎn)的產(chǎn)品的分析可比性，包括用于測試的方法列表和用于確定分析可比性的預(yù)定義驗收標(biāo)準(zhǔn)。

多中心測試

FDA建議使用分析轉(zhuǎn)移方案以確保在每個測試點進行的非藥典試驗適用于預(yù)期目的，并且在所有測試間可重復(fù), 例如，流式細(xì)胞術(shù)。FDA建議在可能的情況下，在測試點中使用相同的SOP、試劑和設(shè)備。