2024年1月31日，F(xiàn)DA正式發(fā)布 “Considerations for the Development of Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Products”，為CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品的開發(fā)提供了化學(xué)、制造和控制（CMC）、藥理學(xué)和毒理學(xué)以及腫瘤適應(yīng)癥（包括血液系統(tǒng)惡性腫瘤和實(shí)體瘤）臨床研究設(shè)計(jì)的相關(guān)建議。

CAR-T 細(xì)胞制造涉及多種生物物料和復(fù)雜的多步驟程序，這些因素都是產(chǎn)品批間差異的潛在來源。因此，生產(chǎn)過程的控制以及適當(dāng)?shù)闹虚g和批次放行檢測(cè)對(duì)于確保 CAR-T 細(xì)胞的安全性、質(zhì)量和批間一致性至關(guān)重要。本期我們聚焦FDA最新版指南，深度解讀CAR-T 細(xì)胞產(chǎn)品CMC階段的五大注意事項(xiàng)！

為了促進(jìn)CAR-T細(xì)胞批次間的一致性，F(xiàn)DA建議對(duì)生產(chǎn)工藝進(jìn)行良好控制，可以通過使用優(yōu)質(zhì)材料、CPP的過程中控制、過程中測(cè)試以及CQA中間體和最終產(chǎn)品的測(cè)試來實(shí)現(xiàn)。FDA建議人類或動(dòng)物源性成分進(jìn)行適當(dāng)?shù)耐庠葱詸z測(cè)。

在當(dāng)前良好生產(chǎn)規(guī)范（CGMP）條件下，應(yīng)使用經(jīng)驗(yàn)證的無菌工藝進(jìn)行生產(chǎn)。IND應(yīng)證明通過開發(fā)或工藝批次生產(chǎn)，按照擬定的制造工藝生產(chǎn)CAR-T細(xì)胞的能力，進(jìn)一步支持產(chǎn)品安全性。一般來說，來自健康捐贈(zèng)者的起始材料適用于生產(chǎn)工藝開發(fā)批次；當(dāng)使用患者來源的起始材料時(shí)，可能建議對(duì)自體CAR-T細(xì)胞進(jìn)行額外的生產(chǎn)工藝開發(fā)。CAR T細(xì)胞的過程中測(cè)試方案通常評(píng)估多個(gè)參數(shù)（例如，活力、細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞表型、CAR表達(dá)）。FDA建議對(duì)CAR T細(xì)胞進(jìn)行穩(wěn)定性研究，以支持2020年1月指南“GT CMC指南V.A.7和V.B.8”中所述的保持和儲(chǔ)存時(shí)間。另外，生產(chǎn)設(shè)備的運(yùn)行參數(shù)應(yīng)驗(yàn)證以支持BLA。

CAR-T細(xì)胞分析檢測(cè)

對(duì)CAR-T細(xì)胞的分析檢測(cè)，目的在于確保產(chǎn)品的安全性、特性、質(zhì)量、純度和強(qiáng)度（包括效力）。在2020年1月指南“GT CMC指南V.A.4和V.B.5”提供了Drug Substance (DS)和Drug Product (DP)分析測(cè)試的一般建議。V.A.4.b.i包括藥典測(cè)試替代方法的建議。V.A.5.b.i包括對(duì)新鮮制備細(xì)胞產(chǎn)品的建議，或在最終配方和患者給藥之間有限保持時(shí)間內(nèi)使用的細(xì)胞產(chǎn)品的建議。

 CAR-T細(xì)胞的標(biāo)簽

IND產(chǎn)品必須貼上標(biāo)簽，并注明“警告：新藥——受美國法律限制用于研究用途”。FDA建議標(biāo)簽包括產(chǎn)品名稱、制造商信息以及“請(qǐng)勿過濾”和“請(qǐng)勿輻照”警告。用自體起始材料制造的CAR-T細(xì)胞必須貼上“僅供自體使用”的標(biāo)簽。根據(jù)對(duì)自體起始材料進(jìn)行的供體檢測(cè)和篩查，自體CAR-T細(xì)胞的標(biāo)簽必須注明“未評(píng)估感染性物質(zhì)”，除非已根據(jù)21 CFR 1271.75、21 CFR 1271.80和21 CFR 1271.85（21 CFR 1271.90(c)(2)）進(jìn)行了所有其他適用的篩查和檢測(cè)。如果進(jìn)行的篩查或測(cè)試結(jié)果表明存在相關(guān)傳染病病原體和/或相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素或臨床證據(jù)，則CAR T細(xì)胞也必須貼上21 CFR 1271.3(h)中所示的生物危害圖例。如果CAR-T細(xì)胞表達(dá)多個(gè)轉(zhuǎn)基因元件，則效價(jià)測(cè)定應(yīng)測(cè)量每個(gè)功能元件的活性。

▉ CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品生命周期內(nèi)生產(chǎn)變更管理和可比性評(píng)估

CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品生命周期中的變化，包括最終容器、培養(yǎng)過程中使用的細(xì)胞因子或細(xì)胞擴(kuò)增持續(xù)時(shí)間的變化，都可能會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量、安全性、功效或穩(wěn)定性，F(xiàn)DA建議申請(qǐng)人在考慮此類變更時(shí)與OTAT溝通。

在規(guī)劃此類變更時(shí)，一般建議申請(qǐng)人考慮以下事項(xiàng)：

1）載體生產(chǎn)過程的重大變化（例如，從貼壁培養(yǎng)到懸浮培養(yǎng)）應(yīng)得到可比性研究的支持，評(píng)估此類變更對(duì)載體和CAR-T細(xì)胞的影響，應(yīng)包括對(duì)變化前后載體的并行分析。

2）對(duì)于培養(yǎng)基中生長因子或添加物濃度或類型的變化，應(yīng)進(jìn)行更穩(wěn)健的可比性研究。

3）當(dāng)CAR-T細(xì)胞或載體生產(chǎn)設(shè)施發(fā)生變化時(shí)，應(yīng)建立生產(chǎn)設(shè)施之間的可比性。

變更管理

關(guān)鍵實(shí)施及產(chǎn)品開發(fā)階段變更，應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，該風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)告知是否需要進(jìn)行分析性可比性研究。FDA建議在啟動(dòng)可比性研究或?qū)嵤┳兏?，將擬議變更的細(xì)節(jié)、伴隨的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和擬議變更管理策略作為修訂提交到IND，建議申請(qǐng)人與OTAT討論研究設(shè)計(jì)和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。可根據(jù)ICH Q5E中描述的一般原則，評(píng)估CAR-T細(xì)胞變化前后的分析可比性。

如果沒有足夠的證據(jù)證明分析的可比性，則可能需要進(jìn)行新的非臨床或臨床研究，這可能會(huì)推遲產(chǎn)品批準(zhǔn)。如果開發(fā)后期變更，且沒有支持BLA的額外臨床研究計(jì)劃，則分析可比性研究應(yīng)與批準(zhǔn)產(chǎn)品進(jìn)行的研究一樣全面和徹底。

可比性研究設(shè)計(jì)

FDA建議，擬議的分析方法適用于檢測(cè)變更對(duì)產(chǎn)品安全性和有效性的潛在影響。用擬議變更生產(chǎn)的產(chǎn)品能滿足當(dāng)前放行標(biāo)準(zhǔn)的證明通常不足以建立可比性。應(yīng)使用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法和預(yù)定義的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析。進(jìn)行批次放行測(cè)試的屬性外，還應(yīng)使用可靠的分析方法監(jiān)測(cè)各種產(chǎn)品屬性，包括細(xì)胞表面標(biāo)記。

由于自體CAR-T細(xì)胞的細(xì)胞起始材料固有的變異性，使用歷史批次來評(píng)估可比性可能不夠。FDA建議盡可能使用相同的細(xì)胞起始材料，通過并行測(cè)試來評(píng)估CAR-T細(xì)胞的可比性。如使用來自健康供體的CAR T細(xì)胞進(jìn)行可比性研究，當(dāng)健康供體生產(chǎn)的產(chǎn)品不足以評(píng)估自體CAR-T細(xì)胞的產(chǎn)品可比性，可比性研究還應(yīng)包括對(duì)由患者細(xì)胞起始材料生產(chǎn)的CAR T細(xì)胞的評(píng)估。

▉ 單中心或多中心生產(chǎn)

單點(diǎn)生產(chǎn)

收集細(xì)胞起始材料，并將其運(yùn)送集中生產(chǎn)點(diǎn)生產(chǎn)CAR T細(xì)胞。CAR-T細(xì)胞隨后被運(yùn)送到本地或遠(yuǎn)程臨床地點(diǎn)進(jìn)行給藥。單點(diǎn)生產(chǎn)可能降低因設(shè)施之間差異而產(chǎn)生的產(chǎn)品可變性。

多中心生產(chǎn)

多中心生產(chǎn)可以縮短從細(xì)胞起始材料收集到自體產(chǎn)品給藥時(shí)間；然而，制造設(shè)施之間差異可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品可變性，申請(qǐng)人應(yīng)該證明在每個(gè)中心生產(chǎn)的產(chǎn)品有可比性，以支持臨床試驗(yàn)結(jié)果分析。FDA建議在可能的情況下，在整個(gè)生產(chǎn)設(shè)施中使用相同的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）、培訓(xùn)、試劑和設(shè)備，還建議IND描述各生產(chǎn)場(chǎng)所制造過程中的任何差異。FDA建議提交數(shù)據(jù)，最好是來自使用相同細(xì)胞起始材料在每個(gè)中心進(jìn)行鑒定，以證明每個(gè)中心生產(chǎn)的產(chǎn)品的分析可比性，包括用于測(cè)試的方法列表和用于確定分析可比性的預(yù)定義驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。

多中心測(cè)試

FDA建議使用分析轉(zhuǎn)移方案以確保在每個(gè)測(cè)試點(diǎn)進(jìn)行的非藥典試驗(yàn)適用于預(yù)期目的，并且在所有測(cè)試間可重復(fù), 例如，流式細(xì)胞術(shù)。FDA建議在可能的情況下，在測(cè)試點(diǎn)中使用相同的SOP、試劑和設(shè)備。